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發(fā)布時間：2025-03-30 00:43:05
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蛋白同位素標記是經(jīng)典的一種蛋白示蹤和蛋白組學(xué)定量技術(shù)，與體外標記技術(shù)相比，同位素標記技術(shù)屬于體內(nèi)標記。原理：用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素 (重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養(yǎng)基中相應(yīng)氨基酸，細胞經(jīng)5-6個倍增周期后，穩(wěn)定同位素標記的氨基酸全部摻入到細胞新合成的蛋白質(zhì)中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數(shù)或蛋白量等比例混合，經(jīng)分離、純化后進行質(zhì)譜鑒定，根據(jù)一級質(zhì)譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進行相對定量。
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動態(tài)濁度法是指通過檢測反應(yīng)混合物的濁度到達預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間，或是檢測濁度增加速度來檢測內(nèi)毒素的方法。在適宜的條件下（溫度，pH值及無干擾物質(zhì)），細菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應(yīng)，使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠。隨著凝膠的形成，反應(yīng)液的吸光度(OD值，濁度)增加，OD值增加的速度與內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)。換言之，OD值上升某一預(yù)設(shè)限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內(nèi)毒素濃度成負相關(guān)，啟動時間的對數(shù)與內(nèi)毒素濃度的對數(shù)成線性關(guān)系，據(jù)此，熒光原位雜交儀可以定量檢測供試品的內(nèi)毒素濃度?？蛻粢部梢砸笪覀兲峁┌攵糠椒?凝膠法進行樣品內(nèi)毒素限度水平檢測。
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熒光原位雜交儀多年抗體研發(fā)經(jīng)驗和細胞實驗技術(shù)經(jīng)驗，擁有靈敏度和特異性探針，并能夠提供多種標記抗體，可供客戶選擇；在定制優(yōu)化實驗條件等實驗內(nèi)容上具有多年經(jīng)驗和心得；經(jīng)驗豐富的實驗技術(shù)人員，精湛的實驗操作水平，嚴格的細胞實驗控制體系，數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快，同時保證檢測結(jié)果客觀、可信；完備的原位雜交儀細胞培養(yǎng)平臺和儀器平臺，高規(guī)格的細胞實驗室， 擁有先進的多波長熒光顯微鏡等重要儀器，靈敏度更高，檢測數(shù)據(jù)更準確；提供詳細完整的實驗報告，包括實驗原始結(jié)果，高清實驗圖片，可進行進一步分析；
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昆蟲細胞表達重組蛋白涉及兩代病毒的制備工作，簡稱為P1和P2代。P1代病毒主要是用于蛋白表達預(yù)實驗以及擴增P2代病毒，P2代病毒用于大規(guī)模蛋白表達制備服務(wù)。昆蟲細胞蛋白表達系統(tǒng)適合于膜蛋白的重組表達，4次及以下跨膜蛋白幾乎可以有效地在昆蟲細胞中進行表達和純化。膜蛋白的純化是一件比較耗時耗力的事情。但是昆蟲蛋白表達系統(tǒng)的優(yōu)勢在于，利用病毒進行轉(zhuǎn)染，操作相對容易，轉(zhuǎn)染體系容易形成（相對哺乳動物瞬時轉(zhuǎn)染體系）。